Whois сервис

Получение результатов


Определение углеводов

При изучении химического состава органического вещества тела водных организмов большая часть авторов устанавливает содержание углеводов косвенным путем по разности между 100 процентами и процентным содержанием белков, жиров и золы, определенных экспериментальным путем. Найденная таким способом величина весьма условно отражает истинное содержание углеводов в исследуемой пробе, так как она в сильной степени зависит от всех погрешностей и недостатков методов определения белков, жиров и золы. Однако отсутствие подходящей методики, позволяющей определять углеводы с достаточной точностью в небольшом количестве анализируемого материала, долгое время не позволяло отказаться от определения углеводов по разности.

В последнее время в связи с развитием фотометрических методов биохимического анализа появились простые и точные методы, которые могут быть успешно применены при определении углеводов в теле водных организмов.

В практике биохимических исследований большую популярность завоевал метод определения углеводов с антроновым реактивом в концентрированной серной кислоте, пишет 1lady.net. Хевит (Hewitt, 1958) применил этот метод для определения углеводов в клетках хлореллы. Этот же метод для определения содержания углеводов в теле водных организмов рекомендуют в своей сводке Стрик- лянд и Парсонс (Strickland, Parsons, 1960).

Навеску тщательно измельченного исследуемого материала (1—3 мг) суспензируют в 10 мл дистиллированной воды. К 1 мл этой суспензии добавляют 10 мл антронового реактива (0,2 г антрона, 8 мл абсолютного этилового спирта, 30 мл воды и 100 мл концентрированной серной кислоты). Содержимое пробирок тщательно перемешивают и нагревают в кипящей водяной бане в течение 7 минут. После нагревания пробирки сразу же охлаждают и их содержимое фотометрируют при длине волны 620 тр. Калибровочная кривая строится по глюкозе.

Мендель с соавторами (Mendel et al., 1954) предложили простой микрометод для определения концентрации углеводов в крови, оказавшийся вполне пригодным для определения углеводов в теле водных организмов (Raymont, Krishnaswamy, 1960, Raymont, Conover, 1961, Остапеня, 1964), пишет njkenpo.com.

Суть этого метода заключается в том, что разбавленные растворы глюкозы либо других сходных углеводов образуют с концентрированной серной кислотой 5-гидрооксиметилфурфурол. который при взаимодействии со своими предшественниками придает раствору голубовато-розовую окраску. Реакция специфична для глюкозы, фруктозы, гликогена, крахмала и других углеводов.

Для определния углеводов по этому методу требуется всего лишь два реактива: 5%-ный раствор трихлоруксусной кислоты, содержащий 0,1% Ag2S04, и химически чистая концентрированная серная кислота с удельным весом 1,84. Из навески исследуе- мого вещества (2—б мг сухого веса) углеводы экстрагируют раствором трихлоруксусной кислоты при 30-минутном нагревании на водяной бане. При этом наряду с экстракцией осаждаются мешающие определению белки и хлориды. После экстракции углеводов пробы центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 минут и к 1 мл чистого супернатанта добавляют 3 мл серной кислоты. Полученную смесь встряхивают и помещают на кипящую водяную баню точно на 6,5 минут. После остывания пробы фотометрируют при длине волны 520 тц. Калибровочную кривую строят по глюкозе Ошибка метода ±5%.

Метод прост, удобен и может быть рекомендован для определения углеводов в теле водных организмов

ГЛАВА 3. РОСТ, СКОРОСТЬ РАЗВИТИЯ И ПЛОДОВИТОСТЬ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УСЛОВИЙ СРЕДЫ


Привлекательность, гигиена